Desarrollo preclínico
In vitro
Cultivos celulares:
Disponemos de varias unidades de cultivos celulares para la preparación de cultivos primarios de neuronas (de hipocampo y de corteza), de astrocítos, de células cromafínes de diversas especies y de varios líneas celulares (neuroblastoma humano, HeLa, PC12) que utilizamos en nuestra investigación.
Órgano aislado:
Los experimentos en órgano aislado permiten realizar un cribado inicial de fármacos, con la idea de buscar una acción farmacológica determinada (por ejemplo, bloqueo de canales de calcio, inhibición de receptores serotoninérgicos) y también una gran variedad de estudios más específicos para conocer el perfil farmacológico y mecanismo de acción de un determinado fármaco, como puede ser su acción sobre un determinado receptor, potencia, eficacia, interacción con otros fármacos, tolerancia.
Radioisótopos:
En el campus de la Facultad isponemos de una instalación radiactiva con licencia para trabajar con los isótopos 45Ca2+, 3H, 32P, 33P, 14C y kits de RIA 125I. Con esta técnica se pueden analizar varios aspectos sobre el mecanismo de acción de un fármaco o su farmacocinética.
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Electrofisiología:
Las técnicas de registro electrofisiológico de “patch-clamp” en células aisladas permiten el estudio de las propiedades de las corrientes iónicas que fluyen a través de los diferentes canales iónicos de la membrana plasmática Estas metodologías resultan, por tanto, útiles para conocer el mecanismo de acción de un fármaco, que puede condicionar su uso, eficacia y seguridad en la clínica. En el ITH disponemos de seis equipos completos de “patch-clamp”, uno de ellos acoplado a un microscopio confocal. También disponemos de un equipo para registros electrofisiológicos con dos electrodos, en ovocitos de Xenopus que expresan determinados receptores cerebrales, tras la inyección de sus ARN mensajeros.
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Técnicas de imagen:
Disponemos de un microscopio confocal y de otros microscopios para estudios de imagen con las más variadas sondas fluorescentes.
Biología Molecular:
Disponemos de dos laboratorios de biología molecular para la genotipación de voluntarios sanos, de pacientes y de ratones transgénicos, el análisis de la expresión de proteínas, transcripción de genes y silenciamiento génico. Poseemos la tecnología para silenciar la expresión de proteínas mediante ARN de interferencia.
El estudio de nuevos fármacos requiere el empleo de animales en los que se desarrollen modelos fisiológicos o patológicos. Dichos modelos permiten validar la eficacia terapéutica de estas sustancias, con un elevado grado de complejidad y fiabilidad, previamente a su estudio en seres humanos.
La gran variedad de especies animales que pueden emplearse, del ratón al cerdo, y los modelos experimentales aplicables, favorecen el estudio de múltiples aspectos fisiológicos y su interacción con los fármacos. Entre estos destacan los estudios hemodinámicos, tanto en el animal anestesiado como consciente, pero también aspectos inherentes a cada tipo de fármaco como, por ejemplo, la valoración de un anestésico local. El empleo de especies de gran tamaño permite unas condiciones de estudio que no pueden darse en animales de menor tamaño y constituyen en muchos casos el paso previo al ensayo clínico.
El Centro de Investigación del Hospital Universitario La Paz, con el que colaboramos estrechamente, dispone de las instalaciones necesarias para la realización de estudios farmacológicos en animales. El equipamiento disponible para la realización de técnicas anestésicas y quirúrgicas complejas (animalarios, quirófanos, monitorización intraoperatoria) permite una amplia gama de aplicaciones. Se dispone de equipamiento de monitorización hemodinámica y electrofisiológica, respiratoria (PowerLab) y un laboratorio de isótopos para el empleo de sustancias marcadas.
Disponemos de varios modelos de isquemia cerebral focal o global, así como de ratones transgénicos con ablación de distintos genes.
Investigación aplicada
Identificación de dianas biológicas relacionadas con la muerte neuronal por apoptosis o necrosis, sobre las que pudiéramos actuar para producir neuroprotección farmacológica.
La investigación aplicada se fundamenta en los conceptos que emanan de la investigación básica.